목적: 이 연구는 HPLC-UV를 이용한 생체 시료 중저농도의 DEHP 분석법을 CDER 기준에 따라 검증하고 검증된 분석법으로 일부 한국인 혈장 중의 DEHP를 분석하여 인체 노출 정도를 뒷받침할 수 있는 기초 자료를 제시하고자 한다. 방법: 혈액 내 DEHP 정량을 위한 HPLC-UV 정량분석법을 CDER의 검증 기준인 검량선 및 직선성과 정밀성, 정확성에 대해 시행하였다. 검증된 분석법으로 울산과 춘천 일부 지역의 근로자 30세 이상 60세 이하의 건강한 남성 255명으로부터 채취한 혈액 내 DEHP를 정량하였다. 결과: 혈액 중 DEHP 정량을 위해 사용된 HPLC-UV는 표준액 0~150 ㎍/ℓ에서 직선성을 나타냈다( r2=0.999). 검량한계는 5.22 ㎍/ℓ, 정량한계는 15.81 ㎍/ℓ이었다. 정밀성과 정확도는 2.5 ㎍/ℓ DEHP 농도에서 첫째 날을 제외하고는 둘째 날과 셋째 날은 CDER기준에 적합하였다. 50 ㎍/ℓ과 150 ㎍/ℓ DEHP 농도는 모두 CDER 기준에 적합하였다. 대상자의 98%가 10 ㎍/ℓ이하이었고, 85%는 5 ㎍/ℓ이하이었고 왼쪽으로 치우친 분포를 나타냈으며, 최고 농도는 18.9 ㎍/ℓ이었다. 대상자의 혈액의 DEHP 농도의 기하평균과 기하표준편차는 0.4±1.5 ㎍/ℓ 이었다. 결론: 본 연구에 사용된 HPLC-UV를 이용한 혈액 중 DEHP 분석법은 CDER 기준에 따라 검증한 결과 정밀도, 정확도, 검출한계 및 정량한계 등 모든 항목에서 기준에 적합하였다. 일부 한국 성인 남자의 혈액 중 DEHP 농도는 0~18.9 ㎍/ℓ이었으며 왼쪽으로 치우친 분포를 나타냈다.
Objectives: This study was conducted to validate a simple, rapid and sensitive reverse-phase high-performance liquid chromatographic method with UV detector (HPLC-UV) and present the plasma level of di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP) in some Korean male workers. Methods: HPLC-UV for quantification of plasma DEHP was validated by the following guideline from the Center for Drug Evaluation and Research (CDER) – calibration/standard curve, precision, accuracy and recovery. Plasma DEHP from 255 healthy Korean male workers aged from 30 to 60 years was analyzed by validated HPLC-UV method. Results: The calibration curve over the range 0~150 ㎍/ℓ for the plasma DEHP standard solution showed linearity(r²=0.999). The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) of plasma DEHP were 5.22 ㎍/ℓ and 15.81 ㎍/ℓ, respectively. The accuracy and precision for 2.5 ㎍/ℓ of DEHP were acceptable in CDER guideline on the second and third day but not first day, and those for 50 ㎍/ℓ and 150 ㎍/ℓ of DEHP were acceptable on all three days(Ed-confirm this addition). The distribution of plasma DEHP level was skewed to the left and ranged from 0 to 18.9 ㎍/ℓ. The plasma DEHP level was lower than 10 ㎍/ℓ for 98% of subjects and lower than 5 ㎍/ℓ for 85%. The geometric mean and standard deviation of plasma DEHP were 0.4±1.5 ㎍g/ℓ. Conclusions: The HPLC-UV method for quantification of plasma DEHP was acceptable by CDER guideline. The plasma DEHP of 255 Korean male workers ranged from 0 to 18.9 ㎍/ℓ and the distribution was skewed to the left.
